Enzyme
Enzyme
0.3
0.25
0.2
0.15
0.1
0.05
0
0 5 10 15 20 25 30
PNP concentration/ μM
0.0004
Figure 11
1/V0
PNPP concentration/ μM 1/(PNPP conc.) (μM^-1) (min/μmoles)
1000 0.001 93.58038555119
2500 0.0004 67.32193348593 f(x) = 48606.0443403955 x +
R² = 0.993655923962829
5000 0.0002 55.45696539485
10000 0.0001 52.08333333333
1/V0 (min/μmoles)
-0.001
1/V0 (min/μm
-0.001
1/(
1mM 2.5mM 5mM 10MM 25MM 50MM 75MM
Absorbance
Absorbance
0.08
0.07605743408 0.122587353 0.15622 0.192053 0.19083 0.216715 0.19932
0.08246652782 0.1350126565 0.1724 0.210755 0.21247 0.237705 0.221449 0.06
0.08809805661 0.1466877162 0.188521 0.228731 0.233971 0.258771 0.243385
f(x) = 0.0
0.09347127378 0.1573491991 0.20325 0.246624 0.254849 0.279951 0.265173 0.04 R² = 0.99
0.09838220477 0.1676543504 0.217859 0.264032 0.275965 0.300614 0.286496
0.1027296782 0.1773606688 0.231787 0.281526 0.296329 0.321653 0.307922 0.02
0.1069134846 0.1862962246 0.245515 0.298437 0.31718 0.342209 0.328869
0
0.1105277985 0.1949682236 0.258483 0.315064 0.337473 0.362631 0.349757 0 0.
0.1138543114 0.2032278478 0.27099 0.331139 0.357731 0.383046 0.369982
0.1169571653 0.211031571 0.283616 0.347148 0.3776 0.403579 0.391026
0.1195635572 0.2182936072 0.295706 0.363126 0.397977 0.424184 0.411172
0.1222178936 0.2252528816 0.307137 0.37856 0.417606 0.444585 0.431691
0.1245724857 0.2318935096 0.318331 0.393766 0.437068 0.464664 0.451988 Absorbance
concentration
0.25
0.2
Absorbance
0.15
f(x) = 0
0.1 R² = 0.9
0.05
20 25 30
0
0
0.35
0.3
0.25
Absorbance
0.2
0.15
f(x) = 0.11
R² = 0.998
0.1
0.05
0
0 0.
y=0.0185x
1/(PNPP conc.) (μM^-1) 1/V0 (min/μmoles) Initial gradient of PNPP Absorbance/Time
0.45
0.010686 93.580385551188 0.0659
0.4
0.014854 67.32193348593 0.0916
0.018032 55.456965394854 0.1112 0.35
0.0192 52.083333333333 0.1184 0.3
Absorbance
0.021519 46.47056089967 0.1327 0.25
0.02113 47.326076668244 0.1303 0.2 f(x) = 0
0.022297 44.849082836256 0.1375 R² = 0.9
0.15
0.1
0.05
Figure 11: Lineweaver-Burk Plot 0
0
110
90
f(x) = 48606.0443403955 x + 45.8419456484534
R² = 0.993655923962829
70
1/V0 (min/μmoles)
50
30
10
-30
50
1/V0 (min/μm
30
10
Absorbance
0.3
0.25
0.2
f(x) =
0.15 R² = 0
0.1
0.05
0
0
0.5
0.45
0.4
0.35
Absorbance
0.3
0.25
0.2
0.15 f(x) = 0.130
R² = 0.9999
0.1
0.05
0
0 0.5
0.5
0.45
0.4
0.35
ce
0.3
0.5
0.45
0.4
0.35
Absorbance
0.3
0.25
0.2
f(x) = 0.1374
0.15 R² = 0.99989
0.1
0.05
0
0 0.5
1mM
Time
0.14
Figure 4: 1mM (min) Abs
0.000833 0.020973
0.12 0.165833 0.033012
0.314167 0.042365
0.1 0.479167 0.052615
0.644167 0.061016
Absorbance
0.08
0.809167 0.068859
0.06 0.974167 0.076057
1.139167 0.082467
f(x) = 0.0658798231502605 x + 0.0214301768556798
0.04 R² = 0.998353921021736 1.304167 0.088098
1.469167 0.093471
0.02 1.634167 0.098382
1.799167 0.10273
0
0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 1.964167 0.106913
Time/ min 2.1275 0.110528
2.290833 0.113854
2.455833 0.116957
2.620833 0.119564
Absorbance Time/ min 2.785833 0.122218
2.950833 0.124572
2.5mM
Time
Figure 5: 2.5mM (min) Abs
0.000833 0.033065
0.25
0.165833 0.051074
0.314167 0.065794
0.2
0.479167 0.081241
0.644167 0.095925
Absorbance
0.15
0.809167 0.109631
f(x) = 0.091605083189442 x + 0.0355722555410014 0.974167 0.122587
0.1 R² = 0.996969031969894
1.139167 0.135013
0.05 1.304167 0.146688
1.469167 0.157349
0 1.634167 0.167654
0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5
1.799167 0.177361
Time/ min
1.964167 0.186296
2.1275 0.194968
2.290833 0.203228
2.455833 0.211032
2.620833 0.218294
2.785833 0.225253
2.950833 0.231894
5mM
Time
Figure 6: 5mM (min) Abs
0.000833 0.047831
0.35
0.165833 0.068147
0.3 0.314167 0.085646
0.25 0.479167 0.104171
0.644167 0.122246
Absorbance
10MM
Time
Figure 7: 10mM (min) Abs
0.000833 0.075801
0.45
0.165833 0.096495
0.4
0.314167 0.114844
0.35 0.479167 0.134628
0.3 0.644167 0.154598
Absorbance
0.3
0.644167 0.147742
0.25
0.809167 0.169164
0.2
f(x) = 0.132697669764053 x + 0.0616692876287619 0.974167 0.19083
0.15 R² = 0.999954923745869
0.1 1.139167 0.21247
0.05 1.304167 0.233971
0 1.469167 0.254849
0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5
1.634167 0.275965
Time/ min 1.799167 0.296329
1.964167 0.31718
2.1275 0.337473
2.290833 0.357731
2.455833 0.3776
2.620833 0.397977
2.785833 0.417606
2.950833 0.437068
50MM
Figure 9: 50mM Time
(min) Abs
0.5
0.45 0.000833 0.0901
0.4 0.165833 0.112079
0.35 0.314167 0.131389
Absorbance
0.5
0.45
0.4
0.35
ce
0.3
Figure 10: 75mM
0.5
Time
(min) Abs
0.45
0.000833 0.065694
0.4
0.35 0.165833 0.088803
0.314167 0.109736
Absorbance
0.3
0.25 0.479167 0.13253
0.2 0.644167 0.155007
f(x) = 0.137466698156467 x + 0.0661435836458193
0.15 R² = 0.999895373815714 0.809167 0.177584
0.1 0.974167 0.19932
0.05 1.139167 0.221449
0
0 0.5 1 1.5 2 2.5 3 3.5 1.304167 0.243385
1.469167 0.265173
Time/ min
1.634167 0.286496
1.799167 0.307922
1.964167 0.328869
2.1275 0.349757
2.290833 0.369982
2.455833 0.391026
2.620833 0.411172
2.785833 0.431691
2.950833 0.451988
1mM 1mM 2.5mM 2.5mM 5mM 5mM 10MM 10MM 25MM
Time Time Time Time Time
(min) Abs (min) Abs (min) Abs (min) Abs (min)
0.45
0.4
0.35
0.3
Absorbance
0.25
0.2
0.15
0.1
0.05
0
0 0.5 1 1.5 2
Time/ min
Time/ min