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ESPECTROFOTOMETRIA

UV-VISÍVEL
Departamento de Engenharia Química – DEQUI
ESCOLA DE ENGENHARIA DE LORENA – EEL/USP
Fundamentos da Espectrofotometria

“Uma maneira boa de cutucar moléculas, é com


radiação eletromagnética (luz)”

A espectrofotometria faz parte da classe dos métodos


analíticos que baseiam-se na interação da matéria
com a energia radiante
•Boa Luz Luz
sensibilidade Perdas:
incidente emergente - reflexões
•Baixo custo de
- dispersão
análise -absorção
•Fácil operação
•Equipamentos
robustos
Luz absorvida
Fundamentos da Espectrofotometria

 Propriedades da luz
Fundamentos da Espectrofotometria

 Absorção de Luz
Espectro Eletromagnético
Fundamentos da Espectrofotometria

 Absorção de radiação eletromagnética


Fundamentos da Espectrofotometria

 Porque ocorre o fenômeno da absorção?


 Moléculas que apresentam elétrons que podem ser
promovidos a níveis de energia mais elevados mediante a
absorção de energia
 TRANSIÇÕES ELETRÔNICAS
 Níveis discretos de energia são absorvidos devido à
vibrações e rotações das moléculas
 ROTACIONAL E VIBRACIONAL
 Por este motivo não se observa uma linha de absorção
nítida, mas sim uma banda de absorção
 ESPECTRO UV-VISÍVEL
Transições Eletrônicas
Energia Rotacional e Vibracional
Espectro UV-Visível
Fundamentos da Espectrofotometria

 Dois requisitos devem ser observados para que uma


determinada radiação possa ser absorvida por uma
molécula:

 1 - A radiação incidente deve ser de freqüência


equivalente aquela rotacional ou vibracional, eletrônica ou
nuclear da molécula,

 2 - A molécula deve ter um dipolo permanente ou um


dipolo induzido, ou seja, deve haver algum trabalho que a
energia absorvida possa fazer.
Cores de Radiação
Região do Visível
Espectros de absorção de diferentes
substâncias

Espectros de absorção diferentes substâncias


(1: bacterioclorofila; 2: clorofila a; 3: clorofila b; 4: ficoeritrobilina; 5: beta-caroteno)
Teoria da Espectrofotometria

 Lei de Lambert  Lei de Beer

Io IT1 Io IT1

1 cm solução 10 g/l

Io IT3 Io IT2
3 cm
solução 20 g/l

It = Io 10-Kl It = Io 10-K´c
Lei de Beer-Lambert
A espectroscopia de absorção molecular está
baseada na medida de absorbância (A) ou
transmitância (T), que estão relacionadas
através das equações:
Lei de Beer-Lambert

A absorbância é muito importante porque ela é diretamente proporcional à


concentração, c, de espécies absorventes de luz na amostra
Desvios da Lei de Beer-Lambert

 LIMITAÇÃO REAL
 A Lei é válida somente para baixas concentrações
 Altas concentrações = Interação entre as moléculas afeta a
distribuição de carga, alterando o coeficiente de
absortividade molar
 DESVIO QUÍMICO
 Surgem quando um analito se dissocia, se associa ou reage
com um solvente para dar um produto que tem um espectro
de absorção diferente
Desvios da Lei de Beer

 DESVIO INSTRUMENTAL
 A lei só é válida para radiação monocromática, ou seja,
para um único comprimento de onda ()
Como minimizar o desvio?
 Escolher a região onde o  é constante na região
selecionada
Partes Essenciais de um
Espectrofotômetro
 Fontes de radiação;
 Monocromador;
 Compartimento de
amostra;
 Detector.
Espectrofotômetros
Feixe Simples

Feixe Duplo
Espectrofotômetros com duplo feixe
Espectrofotômetros com duplo feixe
Fontes de Radiação
Sistema Óptico
Celas de Medida
Detectores
Detectores
Detectores
Espectrofotômetros Portáteis
Absorção Seletiva de Compostos
Orgânicos e Inorgânicos

A. Compostos Inorgânicos
B. Compostos Orgânicos
• Cromóforos
• Auxócromos
Cromóforos Representativos
Composto Cromóforo max (nm) Log ε
Octeno-3 C=C 185 , 230 3,9
Acetileno C=C 173 3,8
Acetona C=O 188 , 279 2,9 , 1,2
Acetato de diazoetila N=N 252 , 371 3,9 , 1,1
Butadieno C=C-C=C 217 4,3
Crotonaldeído C=C-C=O 217 , 321 4,2 , 1,3
Dimetilglioxina N=C-C=N 226 4,2
Octatrienol C=C-C=C-C=C 265 4,7
Decatetraenol [-C=C-]4 300 4,8
Vitamina A [-C=C-]5 328 3,7
Benzeno 198 , 255 3,9 , 2,4
1,4-Benzoquinona 245 , 285 , 435 5,2 , 2,7 , 1,2
Naftaleno 220 , 275 , 314 5,0 , 3,7 , 2,5
Difenilo 246 4,3
Análises Quantitativas
Análises Quantitativas
Análises Quantitativas
Titulações Espectrofotométricas
Análise Qualitativa
D
3,2

C5H11 C5H11
3,0

C
R OH R
2,8
Log ε

A ou B
2,6

OH OH OH
(A) (B)
2,4

C5H11 C5H11
2,2

OH
2,0

240 250 260 270 280 290 300 OH OH


OH (C) (D)
Comprimento de onda (nm)

Espectro de absorção do canabidiol comparado com outros fenóis.

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